PCR-analys: vad är det? Hur man tar PCR-testet korrekt

Inte så länge sedan, en pålitlig,en mycket känslig och snabb metod för att diagnostisera olika infektionssjukdomar hos en person. Denna metod kallas "PCR-analys". Vad är det, vad kommer dess väsen, vilka mikroorganismer det kan avslöja och hur man ska överlämna det, vi kommer att berätta i vår artikel.

Historia av upptäckten

Uppfinnade metoden för polymeraskedjereaktion (PCR)Amerikanska forskaren Cary Myullis 1983. Initialt patenterade metoden för diagnos av företaget "Cetus Corporation", där hans skapare arbetade. Men år 1992 såldes alla rättigheter och patent till företaget "Hoffman-La Roche". Därefter framkom att parallella liknande studier genomfördes och registrerades av andra amerikanska biologer, såsom Alice Chen, David Edgar, John Treel. År 1980 behandlade sovjetforskare A. Slyusarenko, A. Kaledin och S. Gorodetsky detta problem. Därför var det omöjligt att bestämma ensamrätten. Många enastående biokemister har bidragit till utvecklingen av polymeras kedjereaktionsmetoden och patenterat sina innovationer. För närvarande utförs PCR-analys överallt i specialutrustade laboratorier.

Kärnan i PCR-diagnostikmetoden

PCR-analys: Vad är det och hur fungerar det? Kärnan i metoden är att öka i ett specifikt mikrobiellt medium med hjälp av ett speciellt enzym av DNA-polymeras under artificiella betingelser. För att göra detta, multiplicera det befintliga DNA-materialet. Således, i närvaro av en patogen mikroorganism i provet, kommer dess mängd att ökas genom biokemiska laboratoriemanipuleringar, och bakterien kan lätt detekteras i ett mikroskop.

PCR-analys - vad är det?

Hur utförs materialforskningen?

Analysen kräver:

  • DNA-mallen;
  • primrar som förbinder ändarna av ett fragment av material;
  • ett termiskt stabilt DNA-polymerasenzym;
  • kemikalier, säkerställa korrekt drift av enzymer;
  • en buffertlösning som är nödvändig för att skapa lämpliga betingelser för tillväxt och utveckling av DNA-material.

    PCR-analys 12

För att utföra PCR utförs 25-30 repetitioner, bestående av tre steg: denaturering, glödgning och töjning.

För analys av polymeraskedjereaktionanvänd en speciell enhet - en förstärkare. Med modern utrustning kan du ställa in det nödvändiga programmet för uppvärmning och kylning av rören för att eliminera fel vid diagnosen.

Var används diagnosen?

Metoden för polymeraskedjereaktion används på olika områden av medicin:

  • Rättsmedicinska forskare använder den för att identifiera genetiskt material, såsom hår, saliv eller blod;
  • PCR-blodanalys hjälper till med genotypning, till exempel för att detektera en individuell genetiskt manipulerad reaktion på ett specifikt läkemedel;
  • med hjälp av en sådan metod fastställa förekomsten av familjeband mellan människor;
  • Den mest populära PCR-metoden har blivit i medicinsk diagnostik för definitionen av olika infektionssjukdomar.

Vilka infektioner avslöjar PCR?

Så, medicin har länge och framgångsrikt använt analysen av PCR. Vad är det, vi lärde oss redan. Och vilka patogener kan detekteras med det? Följande infektionssjukdomar diagnostiseras med PCR:

  • hepatit A, B, C;
  • ureaplasmosis;
  • candidiasis;
  • chlamydia;
  • mykoplasmos;
  • bakteriell vaginos;
  • infektiös mononukleos;
  • trikomonasinfektion;
  • papillomavirusinfektion;
  • tuberkulos;
  • herpesinfektion av 1 st och 2 nd typer;
  • Helicobacter pylori-infektion;
  • cytomegalovirus;
  • difteri;
  • salmonella;
  • HIV-infektion.

    PCR-analys för HIV

Även PCR-metoder används vid diagnos av cancer.

fördelarna med förfarandet

Diagnos PCR har flera fördelar:

  1. Hög känslighet. Även med några få DNA-molekyler i mikroorganismen bestämmer PCR-analysen förekomst av infektion. Metoden kommer att bidra till kroniska och latenta sjukdomar. Ofta i sådana fall odlas mikroorganismen på andra sätt.
  2. För studien är något material, såsom saliv, blod, kön, hår, epitelceller, lämplig. Det vanligaste är ett blodprov och ett urogenitalt smet på PCR.

    PCR: ta provet

  3. Det kräver inte långsiktig odling av grödor. Automatiserad diagnostik gör att du kan få resultaten av studien efter 4-5 timmar.
  4. Metoden är nästan 100% pålitlig. Endast enskilda fall av falskt negativt resultat registrerades.
  5. Möjligheten att identifiera flera typerpatogener från ett enda prov av material. Detta påskyndar inte bara processen med att diagnostisera sjukdomen, men minskar också materialkostnaderna avsevärt. Ofta ordinerar läkaren en omfattande PCR-analys. Priset för undersökningen, som består av definitionen av sex patogener, är cirka 1500 rubel.

Rekommendationer för att förbereda analysen

För att resultaten ska vara tillförlitliga i PCR-studien bör analysen göras enligt rekommendationerna för den preliminära beredningen för diagnos:

  1. Innan du ger upp saliv, bör du avstå från att ta mat och medicin 4 timmar innan du tar materialet. Skölj munnen med kokt vatten omedelbart före proceduren.
  2. Ovanstående regler bör följas när man tar ett prov från kinnets inre yta. Efter sköljning rekommenderas att en lätt hudmassage utförs för att isolera sekretionen av körteln.
  3. Urin skördas vanligtvis hemma. För att göra detta måste du genomföra en grundlig toalett i könsorganen. Det är nödvändigt att samla 50-60 ml urin i en steril plastbehållare. För att säkerställa materialets renhet rekommenderas att kvinnor sätter in en tampong i skeden, och män drar maximalt i huden. Du kan inte ta materialet under menstruationsflödet.
  4. För att sperma måste du avstå från sexuellaAgera i 3 dagar före insamling Läkare rekommenderar också att vägra att besöka bastun och ta ett varmt bad, dricka alkohol och kryddig mat. 3 timmar före testet måste du avstå från att urinera.
  5. För leverans av urogenitalt smet, till exempel omen analys utförs på chlamydia PCR, både kvinnor och män rekommenderas sexuella vila i 3 dagar. 2 veckor före testet bör antibakteriella läkemedel inte tas. I en vecka måste du sluta använda intima geler, salvor, vaginala suppositorier, sprutbildning. 3 timmar före testet måste du avstå från att urinera. Under menstruationen utförs inte insamlingen av material, bara efter 3 dagar efter att blodutloppet upphör att ta ett urogenitalt smet.

PCR under graviditeten

Under perioden av barnets förväntan många smittsammaSexuellt överförbara sjukdomar är extremt farliga för fostrets normala utveckling. STD kan orsaka intrauterin tillväxt retardation, missfall eller för tidig födsel, medfödda missbildningar av barnet. Därför är det extremt viktigt att passera ett tidigt PCR-test. Det är nödvändigt att lämna in analysen vid registrering - upp till 12 veckor.

Analys på Chlamydia PCR

Staketet härstammar från livmoderhalsenmed hjälp av en speciell borste. Förfarandet är smärtfritt och utgör ingen fara för barnet. Vanligtvis under graviditet analyseras chlamydia med PCR-metoden, liksom ureaplasmos, mykoplasmos, cytomegalovirus, herpes och papillomvirus. Ett sådant provkomplex kallas PCR-6.

PCR för HIV-diagnos

I samband med det faktum att metoden för polymeras kedjereaktionReaktionen är mycket känslig för kroppsförändringar och diagnosförhållandena, många faktorer kan påverka resultatet. Därför är PCR-analys för HIV-infektion inte en tillförlitlig metod, dess effektivitet är 96-98%. I de återstående 2-4% av fallen ger testet falska positiva resultat.

Men i vissa situationer utan PCR-diagnostik av HIVatt inte hantera Vanligtvis administreras det till personer med falskt negativt ELISA-resultat. Sådana indikatorer indikerar att personen ännu inte har utvecklat antikroppar mot viruset och de kan inte detekteras utan en multipel ökning av antalet. Detta kan uppnås genom att genomföra ett blodprov med en PCR-metod.

En sådan diagnos är också nödvändig för att barn i det första levnadsåret föds till en HIV-positiv mamma. Metoden är det enda sättet att på ett tillförlitligt sätt bestämma barnets status.

PCR för diagnos av hepatit

Polymeraskedjereaktionsmetoden möjliggörupptäcka DNA av hepatit A, B, C långt före bildandet av antikroppar mot infektion eller uppkomsten av symtom på sjukdomen. Analysen av PCR för hepatit C är särskilt effektiv, eftersom i 85% av fallen en sådan sjukdom är asymptomatisk och utan tidig behandling blir ett kroniskt stadium.

PCR blodprov

Tidig upptäckt av patogenen hjälper till att undvika komplikationer och långvarig behandling.

Omfattande PCR-undersökning

Omfattande PCR-analys: vad är det? Denna testmetod polimezarnoy kedjereaktion som innefattar att bestämma samtidigt flera arter infektion: Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Gardnerella vaginalis, Candida, trichomonas, cytomegalovirus, ureaplasma urealitikum, herpes 1:a och 2:a typ, gonorré papillomavirus. Priset på sådan diagnostik sträcker sig från 2000 till 3500 rubel. beroende på kliniken, använt material och utrustning, liksom typen av analys: kvalitativ eller kvantitativ. Vad som behövs i ditt fall - läkaren kommer att bestämma. I vissa fall räcker det bara för att bestämma patogenens närvaro, i andra, till exempel vid HIV-infektion, spelar kvantitativ titer en viktig roll. Vid diagnosen av alla ovanstående patogener kallas undersökningen "PCR-12-analys".

Avkoda analysresultaten

Avkodning av PCR-analys är lätt. Det finns bara två skalor av indikatorn - "positivt resultat" och "negativt resultat". När en patogen detekteras kan läkare bekräfta närvaron av sjukdomen med 99% förtroende och fortsätta till behandlingen av patienten. I den kvantitativa metoden för bestämning av infektionen i lämplig kolumn anges en numerisk indikator på detekterade bakterier. Endast en läkare kan bestämma omfattningen av sjukdomen och förskriva den nödvändiga behandlingen.

Var ska man överföra PCR-analysen?

I vissa fall, till exempel vid bestämningHIV-infektion med PCR, med ett negativt resultat, är det nödvändigt att genomföra ytterligare undersökningar för att bekräfta de erhållna indikatorerna.

Var ska analysen göras?

Var ska man passera PCR-analys: på den offentliga kliniken eller i ett privat laboratorium? Tyvärr, i kommunala medicinska institutioner är utrustningen och metoderna ofta föråldrade. Därför är det bättre att föredra privata laboratorier med modern utrustning och högkvalificerad personal. Dessutom, i en privat klinik får du resultat mycket snabbare.

I Moskva erbjuder många privata laboratorierPCR-analys för olika infektioner. Till exempel analyserar de i sådana kliniker som Vita, Complex Clinic, Happy Family, Uro-Pro, PCR. Priset på undersökningen är från 200 rubel. för bestämning av ett patogen.

Man kan dra slutsatsen att diagnosen infektiössjukdomar med PCR är i de flesta fall ett snabbt och pålitligt sätt att upptäcka patogen i kroppen i de tidiga stadierna av infektionen. Men i vissa fall är det värt att välja andra metoder för diagnostik. Endast en specialist kan bestämma behovet av en sådan studie. Avkodning av PCR-analys kräver också ett professionellt tillvägagångssätt. Följ läkarens rekommendationer och ta inte egna test, som inte är nödvändiga.

gillade:
0
Urinalysis av Nechiporenko. Hur man monterar den
Allmän analys av urin. Hur man tar och vad är normen?
Hur testas fekal ockult blod?
Var ska man ta fältet för analys? Vad ska man göra när
Hur korrekt överlämnar analysen av avföring och om det är nödvändigt
Hur donerar blod till hormoner korrekt?
Ett blodprov för HIV kan tas
Hur man skickar urinprov korrekt?
Vad kommer urinanalysen att berätta (avkodning)
Topp inlägg
upp